Прижизненное окрашивание клеток
Витальное окрашивание Прижизненное окрашивание
Витальное окрашивание.
Прижизненные красители.
При изучении живых объектов, особенно обладающих небольшими размерами, нередко применяется окрашивание витальными красителями, т. е. такими, которые в известных концентрациях окрашивают объект, не убивая его. Различают основные и кислые витальные красители, причем при зоологических работах чаще применяются первые.
Необходимо отметить, что при обычных условиях витальные красители не окрашивают ядра живой клетки или в очень малой степени окрашивают основное вещество протоплазмы. Краски адсорбируются главным образом различными клеточными включениями. При длительном воздействии на клетки краски откладываются в протоплазме в виде гранул.
Мы не можем здесь рассматривать теорию витального окрашивания и ограничимся указанием некоторых наиболее распространенных основных красителей.
Нейтральный красный особенно часто применяется для витального окрашивания простейших, при изучении у них процессов внутриклеточного пищеварения и т. д. Применяется в очень слабых концентрациях от 0,1 до 0,001 %-ного. В более крепких концентрациях убивает клетку. Нейтральный красный является индикатором. В кислой среде он имеет ярко-красный оттенок, в щелочной — желтоватый.
Конго красный дает коллоидные растворы с малой степенью дисперсности, поэтому лишь с трудом проникает в протоплазму. Является индикатором, в кислой среде синий, в щелочной — красный. Применяется главным образом при изучении внутриклеточного пищеварения.
Метиленовый синий — один из обычных витальных красителей. Применяется, как и нейтральный красный, в очень слабых концентрациях. Иногда служит для окрашивания некоторых систем органов — нервной системы, выделительной системы (например, у Dinophilus).
Янус зеленый занимает среди прижизненных красителей особое положение. Он окрашивает избирательно митохондрии. Используются очень слабые водные растворы (0,01—0,05%-ные). Окраску объекта лучше вести, не покрывая покровным стеклом. Это связано с тем, что для окраски митохондрий необходимо наличие свободного кислорода.
Продолжительность окраски 20—30 мин.
Омолаживающие и антивозрастные свойства растительной формулы Vital Cell
Клиническое исследование возрастных проблем со здоровьем у 150 взрослых
Джим Инглиш
Vital Cell ® - это усовершенствованная формула на травах, разработанная для противодействия множеству проблем, обычно связанных со старением человека. Было доказано, что поддерживая здоровую микроциркуляцию, Vital Cell повышает уровень энергии, снижает вязкость плазмы, улучшает микроциркуляцию и устраняет повреждение капилляров.Кроме того, улучшая работу внутренних органов и ускоряя удаление продуктов жизнедеятельности клеток, таких как липофусцин, Vital Cell может поддерживать иммунную систему, повышая сопротивляемость болезням и улучшая общее состояние здоровья (см. Восстановление функции тимуса для усиления иммунной поддержки).
Следующая статья представляет собой сокращенное резюме большого клинического испытания Vital Cell с участием 150 пациентов в возрасте от 55 до 89 лет. В своей статье исследователи документально зафиксировали значительное улучшение широкого спектра симптомов, обычно связанных с возрастными дегенеративными проблемами со здоровьем.
Кашель, одышка
Старение человека связано с частичным или полным истощением (атрофией) коры надпочечников и половых желез, что приводит к ухудшению системы мононуклеарных фагоцитов (части иммунной системы) и снижению выработки антител для защиты от инфекции. Другие факторы, такие как сужение или закупорка легочных артерий, способствуют воспалению бронхиальных стенок, что приводит к застою в легких, отеку, разрастанию фибропластов и сужению бронхов.Симптомы часто включают хронический кашель и одышку.
Кашель: Перед приемом Vital Cell пациентов спрашивали об их характере кашля. Приступы кашля, длящиеся пять минут или дольше и возникавшие как утром, так и вечером, считались диагностически значимыми. Тридцать шесть пациентов сообщили, что у них наблюдались приступы кашля продолжительностью более пяти минут как утром, так и вечером. После приема Vital Cell в течение одного месяца 34 пациента сообщили об улучшении (94 процента), и только два случая сообщили о приступах кашля, которые продолжались более пяти минут.
Одышка: Чтобы определить одышку, всем 150 пациентам нужно было подняться на один лестничный пролет, после чего их дыхание контролировалось и регистрировалось. Эти записи сравнивались с записями, собранными при приеме. В начале исследования 42 пациента испытали одышку во время лестничного теста. По завершении исследования только семь пациентов все еще испытывали одышку, в то время как 35 пациентов (83 процента) смогли без труда пройти лестничный тест.
Головокружение
Головокружение - одна из самых частых жалоб пожилых людей. Возникающее в центральном преддверии ствола мозга возрастное головокружение часто связано с нарушением кровотока, вызванным затвердением артерий. Перед испытанием 69 пациентов сообщили о приступах головокружения. После одного месяца лечения 59 пациентов (85 процентов) сообщили, что их симптомы уменьшились, в то время как только 10 пациентов (15 процентов) по-прежнему испытывали приступы головокружения.
Отеки, отечность нижних конечностей
У пожилых людей по мере снижения уровня альбумина в плазме также снижается коллоидно-осмотическое давление плазмы. Кроме того, по мере того, как стареющие кровеносные сосуды становятся все более проницаемыми, уровни половых гормонов в плазме снижаются, что приводит к увеличению удержания воды и натрия. Вместе эти изменения способствуют увеличению накопления жидкости (отека) и отека нижних конечностей. Ранее было показано, что Vital Cell увеличивает уровень альбумина в плазме и половых гормонов, что побудило исследователей предположить, что формула поможет уменьшить отек нижних конечностей.Перед введением Vital Cell у 32 субъектов был диагностирован отек нижних конечностей, включая отек, вызванный хронической сердечной недостаточностью и хронической почечной дисфункцией. После одного месяца лечения Vital Cell у 30 пациентов (94 процента) не было отеков, и только у двух пациентов по-прежнему наблюдались признаки отека нижних конечностей.
Потеря аппетита
Постепенное снижение гипоталамус-гипофизарно-надпочечниковой коры является признаком старения человека. По мере ухудшения работы щитовидной железы секреция пищеварительных ферментов и желудочного сока снижается, что приводит к потере аппетита.До приема Vital Cell 56 пациентов страдали сниженным аппетитом. По завершении исследования 49 пациентов (87 процентов) сообщили, что их аппетит вернулся, и только семь пациентов продолжали демонстрировать признаки плохого аппетита после лечения.
Артериальное давление
У пожилых людей повышенный уровень систолического и диастолического артериального давления является следствием потери эластичности стенок артерий. Другие способствующие факторы включают сужение диаметра кровеносных сосудов, повышенное сопротивление периферическому кровотоку и повышенную вязкость сыворотки крови.Было показано, что Vital Cell оказывает положительное антивозрастное действие, помогая нормализовать уровень артериального давления. Исследователи измерили уровень артериального давления у пациентов до и после лечения с помощью Vital Cell. Из 150 добровольцев для дальнейшей оценки были отобраны только те, у которых систолическое давление больше 160 и диастолическое давление больше 90, всего 62 пациента. Перед введением у 26 пациентов артериальное давление было выше 160/90. Максимальное систолическое давление было 207, а максимальное диастолическое - 120.Среднее систолическое давление составляло 149, а среднее диастолическое давление - 89. После приема Vital Cell в течение 30 дней показания артериального давления выше 160/90 наблюдались только у трех субъектов. Наивысшее систолическое давление среди лечившихся было 150, в то время как среднее упало до 127. Максимальное диастолическое давление упало до 100, а среднее упало до 79.
ЭКГ улучшенная
Из 150 пациентов, допущенных к участию в исследовании, у 48 ранее была диагностирована ишемическая болезнь сердца.До приема Vital Cell у 35 пациентов были обнаружены отклонения ЭКГ, включая изменения STT, частые преждевременные сокращения предсердий, фибрилляцию предсердий и частые преждевременные сокращения желудочков. После лечения 30 пациентов (85 процентов) не имели ранее обнаруженных отклонений ЭКГ, в то время как пять пациентов (15 процентов) все еще имели отклонения ЭКГ.
Кровоток
Исследователи случайным образом собрали образцы крови у 41 пациента (20 мужчин и 21 женщина) до лечения и в конце исследования.Эксперты провели следующие анализы образцов крови:
- Удельная вязкость цельной крови
- Скорость оседания эритроцитов
- Гематокрит (количество эритроцитов)
- Удельная вязкость плазмы
- Электрофорез эритроцитов
Несмотря на то, что после лечения не было обнаружено изменений скорости оседания эритроцитов или гематокрита, результаты испытаний показали значительное улучшение удельной вязкости цельной крови, удельной вязкости плазмы и электрофореза эритроцитов.
Микроциркуляция
Исследователи случайным образом отобрали 51 пациента для измерения кровообращения в микрокапиллярах ногтевого валика до приема Vital Cell и еще раз в конце исследования. Наблюдения под микроскопом показали значительное улучшение скорости кровотока через микрокапилляры ногтевых складок после лечения.
Иммунная функция
Чтобы оценить влияние Vital Cell на иммунную функцию, исследователи отобрали 44 пациента для анализа крови.Эффективность клеточного иммунитета определяли путем измерения скорости трансформации лимфоцитов, а иммунную функцию эритроцитов определяли по образованию розетки эритроцитов (Erosette).
Скорость трансформации лимфоцитов: Среднее значение до введения Vital Cell составляло 53,944. Это значение выросло до 59,444 после одного месяца лечения. Это было значительное увеличение, показывающее статистическую значимость (P <0,05).
Тест образования розетки: Среднее значение до введения Vital Cell составляло 52.176. Это значение значительно увеличилось до 54,647 после лечения. Разница была статистически значимой. (P <0,05).
Метаболизм белков плазмы
Альбумин - это белок плазмы крови, который вырабатывается печенью и секретируется в кровь. Помимо предотвращения утечки жидкости из капилляров в окружающие ткани, альбумин помогает транспортировать небольшие молекулы, такие как кальций, неконъюгированный билирубин, свободные жирные кислоты, кортизол и тироксин.Уровни сывороточного альбумина могут служить полезным маркером хронического заболевания печени и статуса питания. Исследователи измерили уровень альбумина у 44 пациентов до введения Vital Cell и снова в конце лечения.
Альбумин плазмы: Среднее значение альбумина плазмы было 4,573 до Vital Cell и выросло до 4,768 к концу исследования. Эти числа были статистически значимыми (P <0,01).
Глобулин плазмы: Перед введением средний глобулин плазмы был 2.734. Это число снизилось до 2,564, что указывает на статистически значимое улучшение.
Отношение альбумин / глобулин в плазме: Отношение до лечения составляло 1,702, а после периода лечения увеличилось до 1,897. Разница указывает на большую статистическую значимость (P <0,01).
Сводка
Было доказано, чтоVital Cell обладает отличным терапевтическим действием при таких пожилых расстройствах, как стеснение в груди, бессонница, боли в груди, кашель, одышка, учащенное сердцебиение, головокружение и отсутствие аппетита.Было показано, что Vital Cell способствует здоровому кровообращению, поддерживая расширение коронарных артерий и артериол мозга и легких, увеличивая кровоток в коронарных сосудах, улучшая эластичность сосудов, повышая Т-клеточный иммунитет и способствуя синтезу и метаболизму белков.
Эти данные показывают, что Vital Cell может служить ценным средством против старения, помогающим обратить вспять различные расстройства, влияющие на пожилых людей, такие как недостаточное кровоснабжение головного мозга, ишемическая болезнь сердца, хронический бронхит и гипопротеинемия, без риска неблагоприятных или токсических заболеваний. побочные эффекты.
Википедия
Витальное пятно при случайном использовании может означать пятно, которое можно наносить на живые клетки, не убивая их. Жизнеспособные пятна были полезны для диагностических и хирургических методов в различных медицинских областях. [1] При суправитальном окрашивании живые клетки удаляются из организма, тогда как прижизненное окрашивание осуществляется путем инъекции или иного введения красителя в организм. Термин витальное окрашивание используется одними авторами для обозначения прижизненного окрашивания, а другими используется как синоним суправитального окрашивания, основная концепция заключается в том, что исследуемая клетка все еще жива.В более строгом смысле термин витальное окрашивание имеет значение, контрастирующее с суправитальным окрашиванием. В то время как при суправитальном окрашивании живые клетки поглощают окрашивание, в « витальном окрашивании » - наиболее приемлемом, но явно парадоксальном значении этого термина, живые клетки исключают окрашивание, т.е. окрашивают отрицательно, и только мертвые клетки окрашивают положительно, и, следовательно, жизнеспособность. можно оценить путем подсчета процента от общего числа клеток, которые окрашиваются отрицательно. Очень объемные или сильно заряженные пятна, которые не проникают через живую плазматическую мембрану, используются в качестве жизненно важных пятен, а наджизненные пятна - это пятна небольшого размера или активно закачиваются в живые клетки. Lecoeur H (2002). «Обнаружение ядерного апоптоза методом проточной цитометрии: влияние эндогенных эндонуклеаз». Exp. Ячейка Res . 277 (1): 1–14. DOI: 10.1006 / excr.2002.5537. PMID 12061813. .
Новый взгляд на его применение в биомедицине
Голубой краситель Эванса (EB) имеет долгую историю как биологический краситель и диагностический агент с момента его первого окрашивания Гербертом Маклином Эвансом в 1914 году. Из-за его высокой растворимости в воде и медленного выведения, Помимо прочного связывания с сывороточным альбумином, EB широко использовался в биомедицине, в том числе для оценки объема крови и проницаемости сосудов, обнаружения лимфатических узлов и локализации опухолевых поражений. Недавно ряд производных EB были помечены изотопами ПЭТ и могут использоваться в качестве тераностика с широким потенциалом благодаря их улучшенному периоду полужизни в крови и уменьшенному высвобождению.Некоторые из производных EB даже использовались в переводческих приложениях в клиниках. Кроме того, в некоторых доклинических исследованиях на животных недавно было сообщено о новой склонности к некрозу EB. Учитывая все эти интересные и важные достижения в изучении БЭ, в обзоре был сделан всесторонний пересмотр его биомедицинских приложений.
1. Введение
Начиная с начала 20 века, было синтезировано множество синих красителей, таких как метиленовый синий, патентованный синий, трипановый синий и т. Д., А сравнение основных синих красителей приведено в таблице 1 [1– 4].Среди них краситель Evans blue (EB) - это только один из тех, кто имеет долгую историю использования в качестве биологического красителя и средства клинической диагностики [5]. Как синтетический бис-азокраситель, краситель EB также называется T-1824 и Direct Blue 53. Иными словами, с первым окрашиванием, инициированным Гербертом МакЛином Эвансом в 1914 году, этот краситель стал известен, когда был продан компанией Eastman Kodak Company под название «голубой Эванс» в знак признания вклада г-на Эвана в разработку и использование красителей с 1936 г. [5, 6]. С этого момента название «голубой Эванс» стало широко распространенным.
| ||||||||||||||||||||||||||||
жизнеспособность ран :: www.forensicmed.co.uk
гистологические изменения
источник: wikimedia
полиморфных нейтрофилов
Хотя предполагается, что присутствие нейтрофилов представляет собой жизненно важную реакцию, следует отметить, что они могут пассивно достигать поврежденной ткани, и только их присутствие за пределами зоны кровотечения следует рассматривать как положительное свидетельство миграции. Точно так же граница нейтрофилов в сосудах может быть связана с артефактом прикрепления, в то время как проникновение через стенки сосудов считается жизненно важным процессом (Betz 2003).
- самая ранняя реакция жизненно важных нейтрофилов - 15-30 мин после нанесения раны;
- обычно появляется через 15 часов; и
- были описаны через несколько месяцев после нанесения раны.
Таким образом, можно только сказать, что рана без нейтрофилов указывает на период после нанесения менее 15 часов.
макрофаги
Миграция макрофагов в область повреждения происходит одновременно с нейтрофилами, но их снижение подвижности задерживает их появление.
- самое раннее обнаружение - через 3 часа после нанесения;
- обычно обнаруживается через 3 дня + после ранения;
- : избыток макрофагов над нейтрофилами происходит не ранее чем через 20 часов после травмы и обычно через 11 дней.
Липофаги (макрофаги, содержащие жир) и эритофаги (макрофаги, содержащие эритроциты) можно увидеть через 3 дня после ранения.
Гемосидерин (образующийся при разложении гемоглобина) может быть обнаружен с помощью окрашивания Перла (берлинский синий) примерно через 3 дня после ранения (Betz 2003).
(См. Также McCausland and Dougherty (1978) для изучения гистологического старения синяков у ягнят и телят)
Грануляционная ткань и реэпителизация
Это может быть обнаружено примерно через 3 дня после ранения. Полная реэпителизация хирургических ран занимает не менее 5 дней и обычно обнаруживается через 21 день.
.
Оригинальные и стильные пригласительные на свадьбу
