Образ невесты Подготовка к свадьбе Организация свадьбы Развлечения на свадьбе Поздравления и тосты на свадьбу Свадебные приметы, горосокопы и гадания

Время на окрашивание


Сколько нужно держать краску на волосах?

Краска для волос

Окрашивание волос — очень популярная процедура. Многие женщины проводят её самостоятельно. Зачастую кажется, что это очень простой процесс: достаточно нанести краску, подержать положенное количество времени, смыть — и новая причёска готова.

Безусловно, само по себе окрашивание особой сложности не представляет, требует только тщательности, аккуратности и внимательности. Почему же тогда результат не всегда соответствует ожиданиям?

Последствия неудачного окрашивания

Последствия, к которым может привести неправильно проведённая процедура, иногда совершенно неожиданны:

  • цвет не соответствует ожидаемому и далёк от представленного на упаковке;
  • оттенок получился неприятным;
  • цвет не подходит обладательнице;
  • пряди стали тусклыми и непослушными;
  • волосы секутся, ломаются, выпадают.

И это только малый перечень возможных проблем. Во многом они появляются потому, что, собираясь окрасить волосы, мало кто представляет, какая это сложная химическая реакция, удачный результат которой зависит от многих факторов.

Время, в течение которого проводится процедура (оно называется выдержкой) — один из таких факторов.

Все возможные неприятные последствия, кроме неверно выбранного цвета, напрямую зависят как от вида и качества краски, так и от выдержки.

Виды краски и продолжительность окрашивания

Специалисты делят красители на четыре группы. Они различаются по воздействию на волосы и, следовательно, по времени выдержки.

Натуральные красящие вещества

Волосам они не вредят, напротив, приносят ощутимую пользу: укрепляют корни, улучшают структуру, положительно влияют на состояние кожи головы. Это хна, басма, корица, ромашка, лимон, крепкий чай и кофе.

При окрашивании ими необязательно соблюдать чёткие временные рамки.

  • На упаковках с басмой производитель указывает время выдержки (оно зависит от желаемого результата, страны, из которой привезено средство).
  • На основе хны, корицы, ромашки можно даже делать длительные питательные маски для волос (до трёх часов). Продолжительность процедуры зависит от природного цвета, структуры волос и желаемого результата. Для того чтобы получить красивый оттенок, блондинкам достаточно и 15 минут, обладательницам русых прядей потребуется около получаса, шатенкам и брюнеткам — от часа. Чем дольше время выдержки, тем более насыщенный цвет получится.
  • Лимон, чай, кофе чаще применяются для оттеночных ополаскиваний.

Тонирующие средства

Цель их использования — придание волосам определённого оттенка или экспериментирование. Полностью смываются они очень быстро — достаточно вымыть голову 1–3 раза.

Выдержка при нанесении составляет от пяти минут и более (указывается на упаковке), в это время полезно провести лёгкий массаж кожи головы.

Полустойкие краски без аммиака

Внутрь волоса они не проникают, следовательно, не нарушают его структуру. Красящий пигмент распределяется по поверхности волоса, склеивая чешуйки. В результате пряди получаются гладкими, блестящими и послушными, но изменение природного цвета возможно лишь на два-три оттенка (блондинкам немного более), кардинально изменить цвет с их помощью не удастся.

Подкрашивать волосы придётся раз в две-три недели, так как эти красители достаточно быстро смываются, основательно и надолго закрасить седину с их помощью не удастся. Но существенным преимуществом при этом является то, что вреда от них практически нет. Разумеется, полностью исключить вредное воздействие нельзя, но оно минимально.

Точное время окрашивания указывается на упаковке и редко составляет больше тридцати минут. Несмотря на отсутствие агрессивных веществ, произвольно увеличивать его не стоит, химия в них всё же присутствует. Волосы за это «спасибо» не скажут.

Перманентные краски

И, наконец, стойкие перманентные краски. Они содержат аммиак, перекись водорода, другие химические вещества. Позволяют кардинально изменить цвет, надёжно закрашивают седину, долго удерживаются на волосах. Но одновременно с этим они негативно действуют на структуру волос, так как уничтожают природный пигмент и позволяют красящим веществам проникать глубоко внутрь, навсегда изменяя исходный цвет.

В состав современных профессиональных крем-красок включаются средства, позволяющие сделать их более безопасными. Но тем не менее при применении этих красителей нарушать правила, указанные в инструкции, категорически запрещается.

Время воздействия составляет не более двадцати пяти, реже тридцати, минут. Дольше держать краску на волосах не нужно, цвет интенсивнее от этого не станет, а вот повредить, иссушить пряди вполне возможно. Слишком длительная выдержка может привести даже к выпадению волос.

Природным блондинкам следует немного уменьшить время окрашивания от указанного на 3-5-10 минут. Светлые волосы более тонкие, легче поддаются пигментации. То же самое касается и рыхлых, ломких, сухих, повреждённых волос. Для них предварительно в течение 2–3 недель необходимо провести восстанавливающее лечение и остричь секущиеся кончики.

Важно знать, что время окрашивания исчисляется с момента, когда состав полностью нанесён на требуемую длину, поэтому действовать нужно достаточно быстро.

За несколько минут до окончания процедуры рекомендуется провести эмульгирование — смочить волосы водой, взбить средство на волосах и оставить ещё на некоторое время. Эта простая манипуляция активизирует химические процессы и ровнее распределяет краску.

Окрашивание корней

Производители неслучайно указывают в инструкции точное время и последовательность действий для двух процессов: когда требуется покрасить всю массу волос и при окрашивании одних лишь корней. Последним способом рекомендуется пользоваться, если корни отросли, а на остальных волосах цвет потускнел и смылся.

В этом случае краска наносится только на корни и выдерживается 15–20 минут, затем распределяется на всю длину прядей и оставляется ещё на 10–15 минут. Пренебрегать данным правилом не стоит, так как для того, чтобы освежить цвет, этого времени вполне достаточно, а дополнительное химическое воздействие никакой пользы волосам не принесёт.

После окрашивания не рекомендуется смывать красящие составы горячей водой. Она нанесёт дополнительный вред, усилив химическую реакцию.

Ополаскивание тёплой, а затем и прохладной водой закроет чешуйки, волосы станут более гладкими и блестящими.

Последующий уход

Как правило, в комплект с крем-краской входит и закрепитель цвета. Он содержит ухаживающие масла и другие полезные для волос вещества. Им обязательно нужно воспользоваться. Его также нужно подержать на волосах в течение достаточного времени (около пяти минут).

Далее, уход за окрашенными волосами следует осуществлять при помощи специальных шампуней и ополаскивателей для окрашенных волос, так как они содержат вещества, поддерживающие пигментацию.

Применение оттеночных средств позволит увеличить время между окрашиваниями, поможет восстановить, поддержать и углубить цвет.

Здоровье волос зависит как от общего состояния здоровья, так и от манипуляций, проводимых с ними. Частое окрашивание, химическая завивка, термическая обработка часто приводят к последствиям, которые бывает сложно, а иногда и невозможно устранить. Поэтому правила, указанные в инструкции — это не прихоть производителя, а требование безопасности.

Далее вас ждут советы по окрашиванию волос.

Введение в окрашивание H&E: протокол, передовой опыт, шаги и многое другое: Leica Biosystems

Для рутинной диагностики использование гематоксилина и эозина (H&E) намного предпочтительнее для просмотра деталей клеточной и тканевой структуры патологами. Изменение интенсивности пятен часто определяется опытом патологоанатома и личными предпочтениями. Поскольку это окрашивание демонстрирует такой широкий спектр функций цитоплазматического, ядерного и внеклеточного матрикса, почти во всех учебных текстах используются изображения H&E.Сегодня мы продолжаем использовать это простое и незаменимое пятно, которое оставалось неизменным уже более века.

Получайте обновления Knowledge Pathway прямо на ваш почтовый ящик.

Подписка

Если вы просмотрели этот образовательный веб-семинар, тренинг или учебное пособие по программе Knowledge Pathway и хотели бы подать заявку на получение кредитов для продолжения образования в вашей сертифицирующей организации, загрузите форму, чтобы помочь вам добавить в свой транскрипт образовательные кредиты, о которых вы сообщили сами.

Подать заявку на самооценку образовательных кредитов
Рис. 1: Skin H&E.Обратите внимание на сбалансированную окраску этого участка кожи. Ядра окрашены в фиолетовый цвет, а компоненты цитоплазмы - в розовый.

Процедура окрашивания H&E следует базовому протоколу:

  • Депарафинизация
  • Обезвоживание
  • Гематоксилин
  • Дифференциация
  • Синение
  • Эозин
  • Обезвоживание
  • Очистка
  • Покровное стекло

Формат легко воспроизводится и воспроизводится реагенты достаточно эластичны, чтобы обеспечить постоянное окрашивание большого количества слайдов перед заменой реагентов.

Рис. 2: Двоеточие H&E. Обратите внимание на сбалансированную окраску в этой части толстой кишки. Реснички на цилиндрическом эпителии очень четкие.
Фотография предоставлена: Стэнли Хансен

В прошлом пятна и их компоненты обычно производились в лаборатории. Коммерчески доступные готовые реагенты были необычными и дорогими. Таким образом, в качестве экономичного способа выполнения H&E специалисты научились делать красители по мере необходимости.Задача заключалась в том, чтобы убедиться, что качество пятна остается неизменным. Разные техники следуют рецептам, используя свой индивидуальный подход, поэтому изготовление красителей обычно оставалось одним человеком. Тем не менее, в лаборатории было больше технических специалистов, поэтому время, необходимое для подготовки реагентов, не отнимало от общей рабочей нагрузки команды.

Рис. 3: Плацента H&E. Красные кровяные тельца в этом срезе плаценты представляют собой яркую окраску, которую можно получить с помощью этого простого красителя.Большое разнообразие комбинаций красителей гематоксилином и эозином позволяет добиться желаемых результатов с минимальными усилиями. По мере того, как все больше технических специалистов выходят на пенсию и компании становятся более экономичными, сокращение штата делает использование коммерчески доступных реагентов идеальным, потому что технические специалисты могут лучше сосредоточиться на внедрении и нарезке, которые являются областями лаборатории, которые предлагают наименьшую степень автоматизации.

Рис. 4. Клубочки (красная стрелка) и канальцы (синяя стрелка) H&E. Ядра окрашены в фиолетовый цвет, а компоненты цитоплазмы - в розовый.

Для новых профессионалов в области гистологии времена создания реагентов быстро уходят в прошлое. Я считаю, что этот сдвиг может быть проблематичным, прежде всего потому, что часть искусства, характерного для гистологии, утеряна. Одна из моих личных проблем при работе со студентами - помочь им устранить аномалии окрашивания. Когда пятна создаются в лаборатории, команда на собственном опыте узнает, что происходит, когда компонент отсутствует или неправильно добавлен в смесь.Эти изменения могут вызвать незначительные изменения в окрашенных слайдах, которые, как ожидается, в конечном итоге исправит команда гистологов. В конечном счете, новые группы гистологов могут столкнуться с трудностями при устранении незначительных изменений, которые можно легко исправить, не имея опыта создания реагентов и уроков, извлеченных в этом процессе.

Что в пятне H&E?

Окрашивание гематоксилином и эозином используется во многих областях гистологической лаборатории, включая замороженные срезы, тонкоигольные аспираты и залитые парафином ткани.Чтобы лучше понять, что делает слайд с хорошим окрашиванием, важно понимать состав пятен.

Гематоксилин используется для иллюстрации ядерных элементов в клетках. Глубина окраски зависит не только от количества ДНК в ядрах, но и от продолжительности времени, в течение которого образец находится в гематоксилине.

Гематоксилин - довольно простой в изготовлении краситель. Сам краситель добывается из дерева Hematoxylon campechianum. Окисление гематоксилина производит гематеин, который на самом деле является красителем, используемым для окрашивания H&E.Добавление протравы улучшает способность гематеина прикрепляться к анионным (отрицательно заряженным) компонентам тканей.

Рис. 5: На этом изображении крупноклеточной анапластической медубластомы гематоксилин играет ключевую роль в диагностике. Обратите внимание на митотические цифры, указывающие на быстрорастущую опухоль. В клетках также отмечается нерегулярность ядра и скопление хроматина. Фото: Frontalcortex.com

Гематоксилины обычно классифицируются по протраве, используемой перед окрашиванием.Протравы усиливают положительный ионный заряд гематина. Это способствует связыванию гематина с анионным тканевым компонентом, которым чаще всего является хроматин. Тип протравы также влияет на окончательный цвет окрашенных компонентов. Наиболее распространенная протрава, используемая в рутинной гистологии, - это сульфат алюминия-аммония (квасцы). Эта протрава заставляет ядра окрашиваться в красный цвет, который затем меняется на более знакомый синий цвет, когда образец позже промывают слабощелочным раствором.

Гематоксилин Майера - это гематоксилин квасцов, широко используемый краситель, который можно использовать как для прогрессивных, так и для регрессивных красителей.Его часто используют как ядерный контраст для специальных красителей и иммуногистохимии. Для этих целей Майер используется для окрашивания ядер, а затем их воронения без использования дифференциатора. Майер - краситель на водной основе.

Гематоксилин Харриса - еще один широко используемый гематоксилин квасцов, который можно использовать для прогрессивного окрашивания цитологических образцов, но также можно использовать для прогрессивного или регрессивного окрашивания в гистологии. Окрашивание дает четкие детали ядра.Одна из проблем при использовании Harris заключается в том, что его лучше всего дифференцировать с мягкой кислотой, в отличие от более часто используемых дифференциаторов на основе соляной кислоты. Харрис - это пятно на спиртовой основе. Гематоксилин Гилла - это гематоксилин квасцов. Его можно использовать как прогрессивное или регрессивное окрашивание, и он доступен в различных концентрациях. Поскольку в его состав входят вода и этиленгликоль, самоокисление пятна обычно предотвращается в течение нескольких месяцев, что делает его более устойчивым, чем гематоксилин Харриса. Однако природа Gills такова, что может происходить внеядерное окрашивание.Муцин и даже клей, используемый на предметном стекле, могут сильно загрязниться жабрами.

Гематоксилины, использующие соли железа в качестве протравы, обычно используются в специальных красителях. Это потому, что они могут демонстрировать больше тканевых структур, чем гематоксилины квасцов, такие как миелиновые и эластиновые волокна. Одно из самых известных - это пятно Вейгерта, которое используется в окрашивании Верхоффа-Ван Гизона, показанном на изображении.

Рис. 6: Обратите внимание на волокна эластина в аорте, окрашенные с помощью Verhoff-Van Gieson, также известного как эластичное окрашивание.Изменения в этих волокнах указывают на патологические процессы, которые иначе невозможно обнаружить. Фото: Стэнли Хансен

Рассмотрев ядерные пятна, давайте поговорим о красителях цитоплазматических компонентов. Эозин - это наиболее часто используемый контрастный краситель, который различает цитоплазму и ядра клеток. Обычно он розовый, с разными оттенками розового для разных типов волокон соединительной ткани.

Эозин Y - это наиболее часто используемая форма эозина, которую можно использовать как в воде, так и в спирте.Добавление небольшого количества уксусной кислоты также обострит окраску эозина. Эозин с добавлением флоксина усиливает красный цвет, наблюдаемый при окрашивании H&E. Итак, для тех, кто хочет видеть более насыщенные красные, можно добавить флоксин.

Рис. 7: Ядра на этом изображении имеют хороший контраст с цитоплазмой и эритроцитами (RBC) внутри кровеносного сосуда. Обратите внимание на интенсивность эритроцитов по сравнению с розовым цветом цитоплазмы окружающих клеток.

Многие лаборатории считают, что заказ красителей - самый простой способ обеспечить стабильное и воспроизводимое качество.Большое разнообразие комбинаций красителей гематоксилином и эозином позволяет добиться желаемых результатов с минимальными усилиями. По мере того, как все больше технических специалистов выходят на пенсию и компании становятся более экономичными, сокращение штата делает использование коммерчески доступных реагентов идеальным, потому что технические специалисты могут лучше сосредоточиться на внедрении и нарезке, которые являются областями лаборатории, которые предлагают наименьшую степень автоматизации.

Иногда используются другие смеси эозина, такие как EA50 и EA65. Эти красители в основном используются для цитологии и, помимо эозина Y, включают светло-зеленые, желтоватые и коричневые цвета Бисмарка.Добавление этих двух красителей обеспечивает изменение цвета цитоплазмы от бледно-голубого до розового, что лучше всего заметно в плоских клетках мазка Папаниколау. Концентрация смеси определяет обозначение 50 или 65.

Рис. 8: На этом изображении мазка Папаниколау с пациентом с плоскоклеточным раком можно оценить красоту разнообразной окраски цитоплазмы. Красная стрелка указывает на злокачественное ядро ​​с очень маленькой цитоплазмой. Черная стрелка показывает нормальные клетки острого воспаления, подобные по размеру эритроцитам на предыдущем изображении.Обратите внимание, насколько крупнее злокачественная клетка по сравнению с нормальными ядрами на предыдущем изображении.

Дифференциация пятен дает возможность выборочно удалять пятна с тканей по вкусу зрителя. В случае гематоксилина чаще всего используются соляная кислота (для быстрой дифференцировки) и уксусная кислота (для более медленной и контролируемой дифференцировки). Хотя соляная кислота (HCl) исторически была стандартом, более мягкие кислоты используются для более щадящего удаления красителя.Частично эта тенденция связана с использованием автоматического окрашивания, которое должно учитывать движение манипулятора в дополнение к времени, проведенному в реагенте.

Реагенты для синения, такие как «Водопроводная вода Скотта», используются для изменения цвета гематоксилина с красного на ожидаемый традиционный синий цвет. Эти слегка щелочные растворы химически изменяют краситель, вызывая это изменение цвета. В некоторых местах водопроводная вода содержит достаточно минералов, так что из-за pH вода становится достаточно щелочной, чтобы допускать посинение ядер без необходимости использования специального реагента для посинения.Однако в большинстве случаев лаборатории обычно добавляют этот шаг, чтобы обеспечить надлежащее воронение.

В сочетании эти компоненты составляют стандартную окраску, наиболее используемую в гистологической лаборатории.

Выбор протокола окрашивания H&E

Следующим шагом к получению хорошего окрашивания является определение желаемого типа окрашивания H&E. Обычно существует 3 типа окрашивания H&E: прогрессивное, модифицированное прогрессивное и регрессивное.

Прогрессирующее окрашивание происходит, когда гематоксилин добавляется к ткани без последующего дифференцирующего действия для удаления избытка красителя.Поскольку этап дифференцирования отсутствует, может происходить фоновое окрашивание, особенно заряженных или обработанных слайдов. Патологи иногда предпочитают этот тип окрашивания, потому что неклеточный материал, такой как муцин, окрашивается гематоксилином. Это внеклеточное окрашивание может быть индикатором хорошо дифференцированных опухолей.

Рис. 9: В этом отделе толстой кишки муцин все еще виден среди бокаловидных клеток.

Таблица: Этот протокол представляет собой простое регрессивное окрашивание, которое обеспечивает хороший баланс ядерных и цитоплазматических пятен.Этот протокол разработан с учетом слабого кислотного дифференциатора.

После того, как компоненты окрашивания выбраны, можно приступить к базовому протоколу. Оттуда отредактируйте либо гематоксилин с шагом 30 секунд, либо эозин с шагом 15 секунд. Помните, что эозин проникает гораздо быстрее. Если нет необходимости значительно осветлить или затемнить интенсивность окрашивания эозином, лучше всего подойдут более короткие интервалы. Также важно менять только одно пятно за раз.Может показаться, что гематоксилин перекрашен, когда эозина просто нужно побольше.

Поскольку лаборатории продолжают расти, потребность в стабильных результатах и ​​непрерывной пропускной способности становится все более актуальной. Воспроизводимость - важная часть качества лабораторных пятен. При ручном окрашивании, человеческие факторы могут сделать каждую окрашенную подставку для слайдов отличной от предыдущей. Добавление автоматизации не только устраняет возможность несоответствия, но также освобождает технологов для выполнения других задач в лаборатории.

Важно, чтобы был достигнут правильный баланс красителей. Перекрашивание гематоксилином может создать иллюзию недостаточно окрашенного эозина, так же как перекрашивание эозином может сделать гематоксилин более светлым, чем он есть на самом деле. Поэтому при оптимизации окраски убедитесь, что вы редактируете время только одного из компонентов. Этот прием избавит вас от необходимости тратить дополнительное время на корректировку пятна.

Ксилол 2 минуты
Ксилол 2 минуты
100% этанол 2 минуты
100% этанол 2 минуты
95% этанол 2 минуты
Промывка водой 2 минуты
Гематоксилин 3 минуты
Промывка водой 1 минута
Дифференциатор (слабокислый) 1 минута
Промывка водой 1 минута
Воронение 1 минута
Промывка водой 1 минута
95% этанол 1 минута
Eosin 45 секунд
95% этанол 1 минута
100% этанол 1 минута
100% этанол 1 минута
Ксилол 2 минуты
Ксилол 2 минуты
покровное стекло
Фиг.10: На этом изображении ядра в этом образце толстой кишки, кажется, подавляют другие клеточные компоненты. Даже красные кровяные тельца приглушены. Меньшее время в гематоксилине ИЛИ дополнительное время в эозине может обеспечить лучший баланс.
Рис. 11: Ядра в этом отделе почки теряются в розовом цвете эозина. Дополнительное время, проведенное в гематоксилине, сделало бы эти ядра более заметными.

При регрессивном и модифицированном прогрессивном окрашивании используется дифференциатор.Если дифференциатор изготовлен собственными силами, есть вероятность, что он окажется либо слишком слабым, либо слишком сильным. Оба сценария повлияют на окрашивание. Если дифференциатор сильнее, чем предполагалось, он удалит больше гематоксилина и сделает ядра бледными. Время тоже важно. Слишком много времени в правильно приготовленном дифференциаторе также приведет к удалению большего количества гематоксилина и, в конечном итоге, приведет к неокрашиванию ядер.

Умеренная кислотность имеет решающее значение для срока хранения гематоксилина. Без него щелочность ополаскивателя водопроводной водой повысит pH, так что озеро красителя может выпасть в осадок, и цвет изменится с вишнево-красного на пурпурно-красный.Периодическое добавление небольшого количества уксусной кислоты к гематоксилину поможет поддерживать соответствующий pH и может продлить жизнь пятна.

Вода используется как дифференциатор эозина. Обычно после стадии эозина используют 95% этанол. Этанол помогает ополаскивать предметное стекло, а вода вытягивает излишки эозина из тканей. Этот шаг может помочь контролировать окраску, но увеличение времени позволяет получить более светлые пятна, а сокращение времени поддерживает более яркое окрашивание.Однако избыток воды в ксилоле может продолжить процесс дифференциации, и его можно увидеть после заключения в виде розовой дымки на предметном стекле.

Не все ткани созданы одинаково. Кисты и образцы жировой ткани, даже при правильной обработке, могут быть очень трудно увидеть после окрашивания предметного стекла. Эти образцы часто имеют открытые пространства, где жидкость или жир находились в ячейке, а тонкость клеточных стенок может давать видимость света, когда окраска является просто артефактом тканевого типа.

Высококлеточные образцы (например, миндалины, лимфатические узлы) могут быть очень опасными. Помните, что у лимфоцитов мало цитоплазмы, и между клетками почти нет клеточного материала, как в других тканях. По этой причине гематоксилин не должен конкурировать с эозином. Компактная природа клеток также концентрирует ДНК, придавая этим высококлеточным тканям вид перекрашенных, хотя на самом деле их может просто нужно разрезать на более тонкие срезы.

Фиг.12: Лимфатический узел
Рис. 13: Почка - обратите внимание на различия между этим участком лимфатического узла и почки, оба сечения сечением 4 мкм. Эти образцы, окрашенные по одному и тому же протоколу, сильно различаются по внешнему виду из-за клеточности.

Использование чистых и свежих реагентов для депарафинизации необходимо для удаления парафина с предметного стекла перед добавлением красителей. Хотя ксилол является наиболее часто используемым растворителем, его заменители становятся все более популярными, поскольку считаются менее опасными и более экологичными.Вода в растворителях, вызванная загрязнением реагента или окружающей средой с высокой влажностью, снижает способность растворителя удалять парафин. Оставшийся парафин препятствует проникновению красителей в ткани, что делает их неровными.

Самый простой способ предотвратить это - чаще менять реагенты. Добавление небольшого количества гранул осушителя (около столовой ложки на емкость с реагентом) также уменьшит загрязнение воды растворителями. Эти меры особенно важны при использовании заменителя ксилола, поскольку эти реагенты, как правило, гораздо менее устойчивы к любому загрязнению водой, чем ксилол.

Пошаговое руководство по нанесению окрашивания H&E

Окрашивание гематоксилином и эозином (H&E) является наиболее широко используемым красителем в лабораториях гистологии и гистопатологии. При правильном выполнении он может демонстрировать широкий спектр нормальных и аномальных клеточных и тканевых компонентов, и, тем не менее, это относительно простое окрашивание для парафиновых или замороженных срезов. В гистопатологии большая часть случаев может быть диагностирована опытным патологом с использованием только окрашивания H&E.

Небольшое количество слайдов можно эффективно окрашивать вручную в лабораториях с высокой производительностью. Его можно успешно и последовательно выполнять с помощью автоматических аппаратов для окрашивания слайдов.

Существует ряд широко используемых составов гематоксилина и эозина, каждый из которых имеет различные преимущества и недостатки. Некоторые лаборатории предпочитают готовить собственные растворы, в то время как другие выбирают готовые к использованию коммерческие продукты.

Окраска H&E дает полное представление о микроанатомии органов и тканей.Гематоксилин точно окрашивает ядерные компоненты, включая гетерохроматин и ядрышки, в то время как эозин окрашивает цитоплазматические компоненты, включая коллаген и эластические волокна, мышечные волокна и эритроциты. В высококачественном H&E есть тонкие различия в оттенках цвета, создаваемые пятнами, особенно эозином, и это помогает в обнаружении и интерпретации морфологических изменений, связанных с заболеванием.

Важно, чтобы люди, выполняющие и оценивающие окрашивание H&E на качество, знали о тонкостях окрашивания, знали, чего можно достичь, если окрашивание правильно проводится с использованием высококачественных реагентов, и знали, что искать под микроскопом.Поддержание стабильных высококачественных окрашиваний H&E является фундаментальным требованием в лабораториях гистопатологии.

В следующих разделах описаны основные этапы окрашивания H&E.

Удаление воска

После приготовления парафиновой секции все элементы пропитываются парафиновым воском, который является гидрофобным и непроницаемым для водных реагентов, и окружается им. Большинство клеточных и тканевых компонентов не имеют естественного цвета и не видны.Первым шагом в нанесении окрашивания H&E является растворение всего парафина ксилолом (углеводородный растворитель).

Гидратация секции

После тщательной депарафинизации предметное стекло пропускают через несколько смен спирта для удаления ксилола, затем тщательно промывают водой. Срез теперь гидратирован, так что водные реагенты будут легко проникать в клетки и тканевые элементы.

Нанесите краситель для ядер гематоксилина

Теперь предметное стекло окрашено ядерным красителем, таким как гематоксилин Харриса, который состоит из красителя (окисленный гематоксилин или гематеин) и протравы или связывающего агента (соль алюминия) в растворе.Первоначально это окрашивает ядра и некоторые другие элементы в красновато-фиолетовый цвет.

Завершите "Ядерное пятно", "посинение"

После ополаскивания в водопроводной воде срез «вороняется» обработкой слабощелочным раствором. На этом этапе гематоксилин приобретает темно-синий цвет. Теперь срез можно промыть и проверить, правильно ли окрашены ядра, показать адекватный контраст и оценить уровень фонового окрашивания.

Удалить лишнее пятно фона (дифференцировать)

В большинстве случаев, когда используется гематоксилин Харриса, требуется этап дифференциации (обесцвечивания), чтобы удалить неспецифическое фоновое окрашивание и улучшить контраст.Используется слабокислый спирт. После такой обработки снова требуется посинение и тщательное полоскание. Методы окрашивания, которые включают этап обесцвечивания или дифференциации, называются «регрессивными» окрашиваниями.

Нанесите контрастное пятно Eosin Counterstain

Срез теперь окрашивают водным или спиртовым раствором эозина (в зависимости от личных предпочтений). Это окрашивает многие неядерные элементы в разные оттенки розового.

Промыть, обезвожить, очистить и закрепить (нанести покровное стекло)

После окрашивания эозином предметное стекло пропускают через несколько смен спирта для удаления всех следов воды, затем промывают в нескольких ваннах с ксилолом, который «очищает» ткань и делает ее полностью прозрачной.Наносится тонкий слой полистирола, а затем покровное стекло. Если окрашивание и все последующие этапы были выполнены правильно, на слайде будут обнаружены все важные микроскопические компоненты, и он будет стабильным в течение многих лет.

Устранение неисправностей H&E Stains

Хотя окрашивание H&E является относительно простым окрашиванием, существует множество артефактов, которые могут помешать хорошему окрашиванию.

Артефакты могут быть объяснены множеством причин.

Устранение неисправностей H&E Stains

Подготовка образцов тканей для гистологического исследования от пациента до патологоанатома требует осторожности, навыков и тщательных процедур. В этом руководстве представлены практические советы по передовым методам и простые способы избежать распространенных ошибок.

В этом разделе выделены советы по улучшению рутинного окрашивания и заключения покровных стекол. Мы надеемся, что каждый шаг станет ценным напоминанием о правильной гистологической практике, а также поможет в устранении неполадок, когда все же возникают неприемлемые результаты.

Хотите увидеть все 101 шаг к лучшей гистологии?

Щелкните здесь, чтобы загрузить копию сегодня!

Каждый шаг в протоколе окрашивания точно рассчитан по времени.

Время этапов окрашивания приблизительное, «если мы торопимся», некоторые этапы пропускаются. Это может дать стабильные результаты.

Эти срезы были вырезаны из одного блока на одинаковой толщине песка, вручную окрашенного H&E разными сотрудниками с использованием того же метода.Даже макроскопически можно увидеть несостоятельность пятна.

Контрольные слайды регулярно окрашивают для контроля качества окрашивания.

Контрольные слайды никогда не используются для пятен H&E. Это может затруднить определение того, вызвана ли проблема окрашивания плохими реагентами, несоответствующим протоколом или плохой фиксацией.

Этот участок почки включает в себя множество эозинофильных тканевых элементов и хорошо сохранившихся ядер, что позволяет надежно оценить качество окрашивания H&E.Плацента - это еще один тип образцов, который можно использовать в качестве полезного средства контроля.

Время перемешивания, стирки и слива оптимизировано для всех этапов окрашивания.

Время перемешивания, стирки и слива несовместимо. Растворители и реагенты быстро загрязняются. Окрашивание становится непостоянным.

Одним из преимуществ использования автоматического прибора для окрашивания является то, что время перемешивания, стирки и слива одинаковое. Если правильно контролировать другие переменные, это обеспечит хорошие и стабильные результаты.

Депарафинизация слайдов оптимизирована.

Депарафинизация предметных стекол иногда бывает неполной, и на предметных стеклах есть пятна остаточного воска. В результате на срезах образуются неокрашенные или неравномерно окрашенные участки.

На этом срезе, окрашенном H&E, виден большой неокрашенный участок слева и несколько более мелких участков, которые либо частично окрашены, либо неокрашены. Это связано с неполным удалением воска перед окрашиванием.

Растворители и окрашивающие реагенты регулярно меняются в зависимости от количества окрашенных слайдов или обработанных стоек.

Замена растворителей и окрашивающих реагентов происходит бессистемно. Их не заменяют, пока качество пятна не ухудшится.

В этом разделе показано некачественное мутное окрашивание гематоксилином. Этот реагент следует немедленно заменить.

Предметные стекла тщательно увлажняются перед окрашиванием гематоксилином.

Раствор гематоксилина быстро загрязняется спиртом, а иногда и ксилолом. Это вызывает неравномерное окрашивание.

Неравномерное окрашивание гематоксилином, видимое в эпидермисе на этом участке кожи, было вызвано остаточным ксилолом (и следами воска), присутствующим при нанесении гематоксилина.

Эффективность растворов гематоксилина тщательно контролируется. В течение срока службы растворы гематоксилина постепенно разбавляются переносом с предметных стекол и штативов, а также подвержены продолжающемуся окислению.

Окрашивание гематоксилином

меняется изо дня в день, и мы не пытаемся понять, почему.Например, площадь поверхности окрашивающей ванны, степень аэрации во время окрашивания и температура окружающей среды могут влиять на скорость окисления.

Показаны два слайда из одного блока управления. Их окрашивали H&E с использованием идентичных протоколов на автоматическом окрашивателе, но с интервалом в семь дней между запусками. Даже макроскопически разница в уровне окрашивания очевидна.

Тщательное «посинение» ядер щелочным заменителем водопроводной воды Скотта или аммиачной водой всегда проводится после окрашивания гематоксилином.На это требование влияет естественный pH водопроводной воды.

Иногда ядра выглядят розоватыми на завершенных срезах из-за неполного «посинения» в щелочной водопроводной воде после окрашивания гематоксилином. Ядра, которые недостаточно окрашены гематоксилином (или чрезмерно дифференцированы) и чрезмерно окрашены эозином, также выглядят розовыми.

A На этом участке ядра эпидермиса плохо выражены и имеют розоватый цвет. Этот участок не был должным образом «воронен» в щелочной воде после окрашивания гематоксилином (кожа, H&E).
B Это показывает другой участок, который был должным образом «воронен» после ядерного окрашивания. Здесь ядра выражены гораздо лучше (кожа, H&E).

«Посинение» сопровождается очень тщательной промывкой в ​​водопроводной воде для удаления остаточной щелочи, которая может препятствовать окрашиванию эозина и вызывать слабое и неравномерное окрашивание.

Неэффективная стирка после «посинения» (оставления остаточного калия) приводит к тому, что окрашивание эозином становится слабым и неравномерным.

В этом разделе показано влияние остаточного кали на окрашивание эозином.Обратите внимание на пятнистый характер пятна (селезенка, H&E).

Контролируется pH раствора эозина. Его pH поддерживается близким к 5,0 для поддержания оптимального окрашивания. Добавление пары капель уксусной кислоты может использоваться как удобное средство снижения pH.

Не предпринимается никаких попыток контролировать pH эозина. Когда интенсивность окрашивания спадает, раствор заменяют (вынос щелочной водопроводной воды может вызвать повышение pH растворов эозина).

Срез легкого, окрашенного H&E. Пятно эозина всегда очень слабое и совершенно неприемлемое. Обратите внимание, что единственные компоненты, окрашенные эозином, - это эритроциты.

Срезы тщательно обезвоживаются перед помещением в ксилол для очистки.

Срезы иногда быстро пропускают через спирт в ксилол. Очистка в ксилоле, загрязненном водой, может привести к появлению крошечных капелек воды в ткани, которые под микроскопом будут видны как непрозрачные участки с недостаточной детализацией.

Этому разделу не хватает ясности (невооруженному глазу он кажется непрозрачным). Тщательный осмотр показывает, что повсюду присутствуют крошечные капли воды.

Покровное стекло всегда наносится до того, как секция успеет высохнуть и не будет использована высококачественная среда. Необходимо знать о свойствах среды при длительном хранении, потому что кристаллы могут появиться в среде низкого качества - иногда через долгий период (месяцы или годы).

Срезы могут частично высохнуть перед нанесением покровного стекла, в результате чего некоторые ядра станут черными.Mountant, выбранный только на основании цены, может образовывать кристаллы во время длительного хранения, и покровные стекла могут подниматься.

A Этому участку дали возможность частично высохнуть перед тем, как надеть покров. Это привело к тому, что крошечные пузырьки воздуха застряли над некоторыми ядрами, что сделало их черными (иногда это называется «кукурузными хлопьями»).
B Срез покровного стекла, окрашенный H&E, демонстрирующий множество преломляющих сферокристаллов, которые образовались из некачественной среды в течение шести месяцев после монтажа.

Щелкните здесь, чтобы загрузить полную версию 101 шага к лучшей гистологии

Вебинары, обучающие презентации и сопутствующие материалы Leica Biosystems предоставляют общую информацию по конкретным темам и не предназначены и не должны рассматриваться как медицинские, нормативные или юридические консультации. Выраженные взгляды и мнения являются личными взглядами и мнениями докладчиков / авторов и не обязательно представляют или отражают взгляды или мнения Leica Biosystems, ее сотрудников или агентов.

При использовании любого продукта необходимо обращаться к информационным руководствам, вкладышам и руководствам по эксплуатации различных продуктов и устройств. Leica Biosystems и редакция не несут никакой ответственности, прямо или косвенно связанной с использованием устройств, методов или процедур, описанных в этих материалах.

Авторские права © Leica Biosystems Richmond Inc., 2019 г. Все права защищены. LEICA и логотип Leica являются зарегистрированными товарными знаками Leica Microsystems IR GmbH.

.

Руководство по покраске и окрашиванию заборов: быстрые советы

  • HGTV Городской оазис 2020
  • Брат против. Брат
  • падать
  • Хэллоуин
  • Магазин
  • Показывает
  • Смотреть все сезоны
  • Показывает
  • Дизайн и украшение
  • На открытом воздухе
  • Как
  • образ жизни
  • Фото Вдохновение
  • Покупка
  • Информационные бюллетени
  • Журнал
  • Смотреть вживую
  • Лотереи
  • Телепрограмма
  • Выйти
  • Авторизоваться Зарегистрироваться
.

Деревообработка FAQ - Часто задаваемые вопросы

А

Есть три шага к красивой отделке:

1. Подготовка 2. Пятно 3. Защита

1.«Подготовка» заключается в подготовке деревянной поверхности к окрашиванию и финишной обработке, а также включает кондиционирование древесины. Перед тем, как приступить к ремонту или отделке, убедитесь, что поверхность дерева сухая и на ней нет старой отделки в плохом состоянии, краски, воска, жира, полироли, грязи или других посторонних предметов. Если вы планируете окрашивать, обычно на поверхности не должно быть старой отделки.

Устраните трещины, выбоины, отверстия от гвоздей и другие дефекты.Minwax® производит продукты, которые могут помочь в этом процессе. После ремонта зашлифуйте, чтобы получить гладкую однородную поверхность. Отшлифуйте по направлению волокон древесины. После шлифования удалите всю шлифовальную пыль.

Если вы планируете окрашивать, нанесите кондиционер для дерева Pre-Stain. Это поможет вам получить ровный цвет морилки и уменьшить пятнистость даже на древесине, которая склонна к пятнам, например, на сосне или осине. Minwax® производит два кондиционера для древесины перед окрашиванием - один для использования перед нанесением красок на водной основе, а другой для использования перед нанесением красок на масляной основе.

2. Окрашивание - необязательный этап. Пятна придают дереву насыщенный цвет, позволяя просвечивать естественную красоту древесины. Если цвет дерева вас уже устраивает, можно перейти к шагу 3 «Защита».

Перед окрашиванием проверьте выбранную морилку на скрытом участке дерева или на куске отходов вашего проекта. Это поможет вам добиться того, чтобы готовый цвет был именно таким, каким вы хотите.

Чтобы нанести пятно, следуйте указаниям на этикетке пятна. Большинство морилки можно нанести кистью или тряпкой, втирая морилку в дерево. Всегда наносите морилку последний штрих в том же направлении, что и текстура древесины. Дайте пятну проникнуть в соответствии с указаниями на этикетке, затем удалите излишки пятна тряпкой, снова протирая по направлению волокон. Если вы хотите более темный цвет, подождите, пока пятно высохнет, и нанесите второй слой.

3.Защитите прозрачным покрытием. В то время как морилки подчеркивают красоту дерева, прозрачная отделка защищает дерево и подчеркивает его красоту. Независимо от того, решите ли вы окрашивать свой деревянный проект или нет, важно защитить древесину прозрачной отделкой. Прозрачная отделка защитит дерево от воды, бытовой химии, пятен от еды и износа.

Компания Minwax® предлагает различные прозрачные защитные покрытия. Вы можете выбирать между масляными, водными, внутренними, внешними и даже удобными протираемыми покрытиями.Большинство из них доступно в матовом, полуглянцевом и глянцевом исполнении.

Выбор блеска - дело личных предпочтений. Уровень блеска повлияет на внешний вид изделия, но не на его долговечность.

Перед нанесением прозрачного покрытия хорошо его перемешайте. Не встряхивайте баллончик, так как это может вызвать появление пузырей на лаке. Чтобы нанести прозрачную отделку, следуйте указаниям на этикетке. Нанесите финиш тонкими слоями, двигаясь по направлению волокон древесины.

.

Инструкции по легкому окрашиванию перголы

* Спонсором этой публикации является Wagner . Спасибо за поддержку партнеров, которые делают реальность Daydream возможной! Этот пост содержит партнерские ссылки *

Когда мы купили наш дом 7 лет назад, в озеленении почти ничего не было… не говоря уже о террасе или патио. Нам потребовалось несколько лет, чтобы сделать это приоритетным, но мы наконец построили круглую беседку и установили патио .

Наслаждайтесь этой небольшой серией фотографий, на которых изображены десятки часов тяжелого труда, потные срывы и настоящий скрежет зубов.

Мы СТОЛЬКО ВРЕМЕНИ проводим в этом патио, и мы даже не заметили, насколько необработанная древесина беседки так потускнела и потускнела за последние пару лет.

Но идея окрашивания перголы (не говоря уже о ЗАПЕЧАТАНИИ) была устрашающей.

СО. много. доски.

Я представлял себя чистящим его щеткой, одну затяжку за раз… в результате я лежал посреди патио в луже побежденных слез и морилки.Но после некоторых исследований мы поняли, что можем РАСПЫЛИТЬ продукт с помощью краскораспылителя. Я все еще колебался и БОЛЬШЕ этого. Но наши друзья из Wagner прислали нам один из своих краскопультов ( Flexio 590 ) для этого проекта, и эта штука работает как мечта .

Конечно, не помешает и то, что ступицы имеют высоту 6 футов 8 дюймов. LOLOL! Он сделал первый слой, а я второй ... и мое пальто заняло в два раза больше, чем , потому что мне приходилось спускаться и перемещать лестницу каждые 30 секунд.Но все прошло так гладко, что я не жаловался! Этот малярный пистолет настолько прост в эксплуатации… И его легко чистить! И нам понравилось, что нам не нужно тащить наш гигантский воздушный компрессор во внутренний двор, чтобы окрасить беседку.

Мы использовали краситель / герметик Thompson's Water Seal в «Woodland Cedar» , и нам нравится насыщенный цвет кедра. Это делает дерево намного более ярким и живым! И уж тем более, что он вот-вот рухнет.

Абсолютно ХУДШАЯ часть этого проекта заключалась в том, чтобы оклеить дом лентой / обоями, чтобы защитить его от брызг.Разве запись на пленку и подготовка не всегда хуже?

Однако это было проще, чем мы думали, что будет, потому что Ник обнаружил этот блестящий маленький инструмент , который на самом деле распределяет малярную ленту и бумагу вместе . По сути, это продукт, меняющий жизнь всех мастеров.

После нанесения обоих слоев морилки и удаления бумаги мы отступили, чтобы оценить весь эффект нашей недавно отремонтированной перголы!

Я имею в виду, посмотрите, чем отличается этот удобный коллаж до и после, который я сделал.

Да, да, я знаю, что это было не ярмарка до и после фото, потому что одно было в пасмурный день, а другое - в солнечный. Но вы правильно поняли? К тому же я не могу контролировать погоду ооочень ...

Наша привлекательность для сдерживания выросла с нуля до шестидесяти в мгновение ока! И это делает НАМНОГО лучше снимки, когда я фотографирую нашу маленькую семью, наслаждающуюся осенним днем.

По совершенно другой теме, я хотел бы показать вам, чем наши девочки занимались в наши 3-дневные выходные.

Подожди…

ТАК МНОГО СЕРДЦА.

У меня такое чувство, что когда идет дождь, у нас в этом доме будет много слез. Я намекал на это в надежде заранее подготовить их к травме.

ОБНОВЛЕНИЕ… ровно через 5 минут после того, как я это напечатал, пошел дождь. Девочки посмотрели в окно и сказали: « идет дождь! Думаю, позже нам придется снова рисовать все наши сердца.Ты думаешь, в Мексике идет дождь? » LOLOL… Я не могу придумать это.

Что ВЫ делали в прошедшие выходные в День труда? Вы выходите и катаетесь на лодке? (мы немного поплыли на каноэ!) Или вы занимались проектами дома или двора?

~ Бетани

.

Смотрите также



Образ невесты Подготовка к свадьбе Организация свадьбы Развлечения на свадьбе Поздравления и тосты на свадьбу Свадебные приметы, горосокопы и гадания
Club Brides - Клуб Невест

Как показывают статистика и практика, в подавляющем большинстве случаев именно невеста является главным идеологом и главной движущей силой процесса подготовки к свадьбе.
Как подобрать счастливую дату свадьбы, как стильно и оригинально оформить свадебные приглашения, как выбрать самое красивое свадебное платье, какую сделать прическу, каким должен быть букет невесты, во что одеть подружек невесты, где организовать банкет, как оформить банкетный зал, какого фотографа и видеооператора пригласить… Вопросов при подготовке к свадьбе возникает сотни… Без совета и помощи не обойтись.
Свадебный портал «Клуб Невест» (Club Brides) посвящен всем самым главным вопросам, которые возникают у будущих молодоженов в процессе подготовки к свадьбе, а также всем тем вопросам и нюансам, которые необходимо учесть, чтобы свадьба стала действительно красивым, ярким, веселым и запоминающимся событием.
Мы подскажем вам, как подобрать счастливую дату свадьбы, как стильно и оригинально оформить свадебные приглашения, как выбрать самое красивое свадебное платье, какую сделать прическу, каким должен быть букет невесты, во что одеть подружек невесты, где организовать банкет, как оформить банкетный зал, какого фотографа и видеооператора пригласить и многое-многое другое…


2015- © Club Brides - Клуб Невест | Содержание | Карта сайта
Копировать материалы без размещения прямой активной ссылки на CLUBBRIDES.RU запрещено!