Образ невесты Подготовка к свадьбе Организация свадьбы Развлечения на свадьбе Поздравления и тосты на свадьбу Свадебные приметы, горосокопы и гадания

Желтое окрашивание возникает при действии на белок


Белки окрашивание - Справочник химика 21

    БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — цветная реакция, которую дают с солями меди в щелочной среде биурет h3N ONH ONh3, амиды и имиды кислот, полипептиды, белки и другие соединения, содержащие группировки —СО—NH—, Б. р. — цветная реакция на белок — лежит в основе его количественного колориметрического определения. Если к щелочному раствору белка прибавить раствор uSO , появляется фиолетовое окрашивание. Чувствитель-1юсть Б. р. невысока. [c.45]
    Ксантопротеиновая реакция. Белок с концентрированной азотной кислотой дает желтое окрашивание. Желтые пятна, образующиеся на коже при неаккуратной работе с концентрированной азотной кислотой,—результат ксантопротеиновой реакции с белками кожи.  [c.388]

    Белки относятся к высокомолекулярным соединениям. Молекулярная масса их 20 000 и даже 15 000 000 у. е. Они растворяются в воде, образуя коллоидные растворы (вследствие огромных размеров молекул). Белки устойчивы лишь в определенных условиях. При повышении температуры происходит необратимая коагуляция белков, а под действием электролитов — обратимая. Первая характерная для белков реакция ксантопротеиновая—реакция с азотной кислотой. Под действием азотной кислоты белок свертывается, образуя сгусток оранжевого цвета. Вторая характерная реакция на белки — это биуретовая реакция — фиолетовое окрашивание белка при взаимодействии его с гидроксидом меди. [c.371]

    Цветные реакции белков. Биуретовая реакция. При взаимодействии в щелочной среде с солями меди (Си504) все белки дают фиолетовое окрашивание. Аналогичную реакцию дает уже упомянутый ранее биурет (стр. 215), откуда и происходит название этой реакции [c.296]

    Биуретовая реакция на белки. В пробирку с 1 мл 10%-ного раствора яичного альбумина вливают 1 мл 10"6-ного раствора едкого натра и 2 капли 2%-ного раствора медного купороса. Появляется красно-фиолетовое окрашивание, указывающее на наличие в белковой молекуле пептидных связей —СО—КН—. [c.120]

    Биуретовая реакция. Прн прибавлении к раствору белка едкого натра и нескольких капель разбавленного раствора сернокислой меди получается фиолетовое окрашивание. Этой реакциерТ часто пользуются для качественного открытия белка.  [c.388]

    При обработке белка концентрированной азотной кислотой происходит окрашивание препарата в желтый цвет, обусловленный образованием соответствующих ароматических нитропроизводных. Последующая обработка его водным раствором аммиака или щелочи вызывает появление оранжевой окраски. [c.355]


    Биуретовая реакция (реакция Пиотровского). В щелочной среде белки, а также продукты их гидролиза — полипептиды дают фиолетовое или красно-фиолотовос окрашивание с солями меди. Реакция обусловлена наличием пептидных связей. Положительная биуретовая реакция проявляется у соединений, содержащих не менее двух [c.6]

    Хорошими красителями для нуклеиновых кислот являются галлоцианин (или оксазин) и толуидиновый синий, Галлоцианин с хромовыми квасцами дает соединение краплак-катион, которое с фосфатными группами нуклеиновых кислот образует соли темно-синего цвета. Чтобы исключить влияние белков, окрашивание нуклеиновых кислот нужно вести при pH 1,5—1,6.  [c.92]

    С нингидрином о. дает желтое окрашивание, с изатином-синее. С солью Рейнеке ЫН4[Сг(КНз)2(8СК)4]-Н20 образует нераств. соединение. Остатки Ь-О. входят преим. в состав белков соединит, ткани-коллагена (до 13%), а также эластина алло-Ь-О. встречается в своб. состоянии в цветах сандалового дерева, его остатки входят в состав токсичных пептидов бледной поганки - фаллоидина, а- и Р-аманитинов. [c.360]

    Белки дают фиолетовое окрашивание с гидроксидом меди (11). [c.357]

    Широкое распространение в настоящее время получил так называемый зональный электрофорез — электрофорез на твердом носителе (на бумажных полосах, агаре, крахмале, акриламиде), пропитанном буферным раствором с нужным значением pH. Положение белков на бумаге или геле определяют путем фиксации и последующего окрашивания их тем или иным красителем (обычно бромфеноловым синим, ами-довым черным или кумасси синим). Количество белка в каждой фракции можно ориентировочно определять по интенсивности окраски связанного красителя. Такое определение не дает строго количественного соотношения белковых фракций, так как количество красителя, связываемого различными белками, неодинаково.  [c.89]

    Для избирательности адсорбции несомненное значение имеют электрические заряды адсорбента и адсорбтива, так как разноименно заряженные частицы будут легче соединяться. Именно этим объясняется хорошее окрашивание щелочных белков клеточных ядер, заряженных в нейтральной среде положительно, кислыми (отрицательно заряженными) красителями, а кислых белков протоплазмы — основными (положительно заряженными) красителями. [c.142]

    КСАНТОПРОТЕЙНОВАЯ РЕАКЦИЯ, цветная качеств, р-ция на белки. Для ее осуществления к р-ру белка прибавляют конц. HNOj до тех пор, пока не прекратится образование осадка, к-рый при нагр. окрашивается в желтый цвет. Окраска возникает в результате нитрования ароматич. колец аминокислотных остатков белка (тирозина и триптофана). При добавлении к охлажденной жидкости избытка щелочи появляется оранжевое окрашивание, обусловленное образованием солей нитроновых к-т с хииоиовой системой сопряженных двойных связей, напр.  [c.547]

    Обработка агаровых пластинок. После окончания электрофореза ток выключают, предметные стекла с агаровым гелем тотчас извлекают из камеры и помещают на 30 мин в 5%-ный раствор СНзСООН. Каждую пластинку покрывают листочком фильтровальной бумаги, смоченным в 5%-ном растворе СНзСООН, для удаления воды и солей и высушивают при комнатной температуре в течение ночи. Для ускорения высушивания его проводят при температуре 37 °С или под струей теплого воздуха. Бумагу, приставшую к агаровой пленке, осторожно снимают, предварительно смочив ее водой. Перед окрашиванием агаровое поле должно быть совершенно сухим и прозрачным. Окрашивание белков на электрофореграммах проводят амидовым черным 10 Б в течение ночи. Не связавшийся с белком краситель отмывают 5%-ным раствором уксусной кислоты. Отмытые электрофореграммы высушивают при 37 °С.  [c.93]

    В три пробирки вносят соответственно растворы яичного бсл]са, глицина и фенилаланина (по 2,5 мл), добавляют по 5 мл раствора С и оставляют па 10 мин., после чего приливают по 0,5 мл рабо

8 признаков и симптомов белковой недостаточности

Не у всех одинаковая потребность в белке. Это зависит от многих факторов, включая массу тела, мышечную массу, физическую активность и возраст.

Возможно, масса тела является наиболее важным фактором, определяющим потребность в белке. В результате рекомендации обычно представлены в граммах на каждый фунт или килограмм веса тела.

Рекомендуемая суточная доза (RDA) составляет 0,4 грамма протеина на каждый фунт массы тела (0.8 грамм на кг). По оценке ученых, этого должно хватить для большинства людей.

Это соответствует 66 граммам белка в день для взрослого человека с весом 165 фунтов (75 кг).

Для спортсменов Американский колледж спортивной медицины рекомендует ежедневное потребление белка в диапазоне от 0,5 до 0,6 грамма на каждый фунт массы тела (1,2–1,4 грамма на кг), что должно быть достаточно для поддержания мышц и восстановления после тренировок (37). .

Однако ученые не согласны с тем, сколько достаточно.Ежедневная рекомендация Международного общества спортивного питания составляет 0,9 грамма белка на фунт веса (2 грамма на кг) для спортсменов (38).

Как и спортсмены, пожилые люди, похоже, имеют более высокие потребности в белке.

В то время как RDA в настоящее время одинакова для пожилых и молодых людей, исследования показывают, что она занижена и должна быть увеличена до 0,5–0,7 грамма на фунт массы тела (1,2–1,5 грамма на кг) для пожилых людей (39, 40) .

Проще говоря, если вы старше или физически активны, ваши ежедневные потребности в белке, вероятно, выше, чем текущая суточная норма потребления 0.4 грамма на фунт веса тела (0,8 грамма на кг).

К самым богатым источникам белка относятся рыба, мясо, яйца, молочные продукты и бобовые.

Резюме: Рекомендуемая суточная норма белка составляет 0,4 грамма на фунт (0,8 грамма на кг). Однако исследования показывают, что требования могут быть выше для спортсменов и пожилых людей. Насколько больше - вопрос споров.
.

зондов для ядра — Раздел 12.5 | Thermo Fisher Scientific

Следите за этими интерактивными значками

В этом разделе описывается использование красителей нуклеиновых кислот Molecular Probes для визуализации ядер и хромосом, а также для анализа структуры полос хромосом.Общие химические и спектроскопические свойства этих красителей нуклеиновых кислот описаны в разделе «Пятна нуклеиновых кислот» - Раздел 8.1. Применение красителей нуклеиновых кислот для изучения жизнеспособности клеток, пролиферации и апоптоза обсуждается в разделе «Анализы жизнеспособности, пролиферации и функции клеток» - Глава 15.

Контрасты, описанные в этом разделе, совместимы с широким спектром методов цитологического мечения, включая прямые или непрямые методы обнаружения на основе антител, гибридизацию in situ и обнаружение специфических субклеточных структур с помощью флуоресцентных зондов, таких как митохондриально-селективный MitoTracker реагенты (Зонды для митохондрий - Раздел 12.2), F-актин-селективный фаллоидин (зонды для актина - раздел 11.1) и автофлуоресцентные белки (использование органических флуоресцентных зондов в сочетании с GFP - примечание 12.1).

Флуоресцентные белковые маркеры ядра

Реагенты GFP и RFP, нацеленные на ядро ​​CellLight

Реагенты

CellLight сочетают в себе полезность и избирательность целевых флуоресцентных белков с эффективностью технологии доставки и экспрессии генов BacMam.Эти реагенты объединяют в себе все обычные преимущества технологии BacMam, включая высокоэффективную трансдукцию клеток млекопитающих и длительную титруемую экспрессию (технология доставки и экспрессии генов BacMam - примечание 11.1). Реагенты CellLight поставляются в готовом к использованию формате - просто добавляйте, инкубируйте и изображайте - с высокоэффективной экспрессией в клеточных линиях, первичных клетках, стволовых клетках и нейронах. Полный список реагентов CellLight и их целевых последовательностей можно найти в разделе «Реагенты CellLight и их целевые последовательности» - Таблица 11.1.

CellLight Nucleus-GFP (C10602), CellLight Nucleus-RFP (C10603) и CellLight Nucleus-CFP (C10616) - это векторы экспрессии BacMam, кодирующие слияния зеленого флуоресцентного белка (GFP), красного флуоресцентного белка (RFP) и голубого флуоресцентного белка (CFP). ) соответственно с последовательностью ядерной локализации SV40 (NLS). В дополнение к общей идентификации и демаркации ядра в экспериментах по визуализации живых клеток, SV40 NLS-GFP широко используется для анализа ядерно-цитоплазматического транспорта и целостности ядерной оболочки.

CellLight Histone 2B-GFP (C10594) и CellLight Histone 2B-RFP (C10595, , рисунок 12.5.1, ) представляют собой векторы экспрессии BacMam, кодирующие слияния GFP или RFP с гистоном 2B. Мечение гистоном 2B-GFP - это хорошо зарекомендовавший себя и минимально инвазивный подход для визуализации хроматина в живых клетках и особенно полезен для визуализации деления митотических клеток в реальном времени.

Alexa Fluor 488 Гистон h2

Конъюгат Alexa Fluor 488 с богатым лизином гистоном h2 тимуса теленка (h23188) является полезным зондом для анализа транспорта ядерных белков.Транслокация гистона h2 из ядра в митохондрии указывает на разрывы цепи дцДНК. Флуоресцентные конъюгаты гистона h2 также можно использовать для обнаружения воздействия на поверхность мембраны кислых фосфолипидов, таких как фосфатидилсерин.

Ядерные контрасты для живых клеток и незакрепленных тканей

Окрашивание проницаемой для клеток нуклеиновой кислоты позволяет окрашивать живые клетки или ткани, которые были минимально обработаны.Окрашивание ядер может выявить естественное расположение клеток в тканях и может предоставить средства для отслеживания ядерных изменений на протяжении таких процессов, как митоз и апоптоз (анализы апоптоза - раздел 15.5). Большинство из этих красителей слабо влияют на функцию клеток, позволяя отслеживать движение живых клеток в процессе развития или заражения других клеток.

Синие флуоресцентные контрастные вещества, проницаемые для клеток

Проникающий через мембрану краситель Hoechst 33342 (h2399, h4570, h31492) широко используется для окрашивания ядер живых клеток.Краситель Hoechst 33342 показывает АТ-селективное окрашивание, а окрашенные красителем Hoechst клетки и ткани практически не проявляют цитоплазматического окрашивания. Hoechst 33342 обычно используется для различения компактного хроматина апоптозных ядер в сочетании с маркировкой BrdU для идентификации реплицирующихся клеток и сортировки клеток на основе содержания ДНК (Анализы на апоптоз - раздел 15.5).

Хотя не все синие флуоресцентные проницаемые для клеток красители SYTO в окрашивателях нуклеиновых кислот - Раздел 8.1 демонстрируют избирательное ядерное окрашивание, SYTO 40 (S11351) демонстрирует превосходное окрашивание ядер в эмбрионе пресноводной улитки ().Все синие флуоресцентные красители SYTO, перечисленные в Проникающих в клетки пятен цианиновых нуклеиновых кислот (таблица 8.3), доступны по отдельности в виде растворов в ДМСО (пятна нуклеиновых кислот - раздел 8.1) или в наборе для пробоотборника (S11350), чтобы облегчить поиск наилучшего контрастного красителя для конкретный тип клеток или тканей.

Проникающие в клетки зеленые флуоресцентные контрастные вещества

Некоторые из зеленых флуоресцентных красителей SYTO, проникающих в клетки (окраска цианиновых нуклеиновых кислот, проникающих в клетки - Таблица 8.3, Пятна нуклеиновых кислот - Раздел 8.1) являются отличными ядерными красителями для живых клеток в культуре () и для незафиксированных тканевых срезов. Зеленый флуоресцентный краситель SYTO 11 (S7573) продемонстрировал избирательное ядерное окрашивание в сердечной ткани, эндотелии сосудов и культивируемых миоцитах, а также в культивируемых клетках гладких мышц сосудов аорты, что указывает на перспективу для широкого использования в исследованиях с помощью неинвазивного конфокального лазерного сканирующего микроскопа. Окрашивание красителями SYTO 11 и SYTO 13 (S7575) облегчало подсчет клеток в срезах мозга без нарушения трехмерной среды.Окрашивание красителем SYTO 11 использовали для отслеживания движения клеток во время развития у целых эмбрионов рыбок данио. Краситель SYTO 11 также использовался для идентификации мейотических клеток в развивающейся мозговой ткани. Trypanosoma cruzi , окрашенный красителем SYTO 11, можно легко обнаружить в инфицированных ими клетках. Краситель SYTO 13 был использован в эксперименте с двойной меткой фаллоидина BODIPY 558/568 (B3475, Зонды для актина - раздел 11.1) для окрашивания актиновых волокон, что позволило одновременно наблюдать ядерные изменения и изменения цитоскелета в апоптотических клетках.Краситель SYTO 12 (S7574) использовался для отслеживания движения хромосом во время мейоза в живых миоцитах кукурузы, а краситель SYTO 14 (S7576) позволил исследователям проследить локализацию РНК в живых клетках. Краситель SYTO 16 (S7578) служил эффективным ядерным контрастом в культивируемых клетках и использовался для окрашивания ядер в цельных корнях кукурузы.

Зеленые флуоресцентные красители SYTO, перечисленные в Проникающих в клетки пятнах цианиновых нуклеиновых кислот - таблица 8.3, доступны по отдельности в виде растворов в ДМСО (красители нуклеиновых кислот - раздел 8.1) или в составе набора для пробоотборника красителей с зеленой флуоресцентной нуклеиновой кислотой SYTO (S7572). Этот набор для пробоотбора красителей SYTO содержит по 50 мкл каждого из восьми различных зеленых флуоресцентных красителей SYTO для облегчения поиска наилучшего контрастного красителя для определенного типа клеток или тканей.

Проникающие в клетки оранжевые и красные флуоресцентные контрастные вещества

Оранжевые и красные флуоресцентные флуоресцентные красители нуклеиновой кислоты SYTO, проницаемые для клеток, перечисленные в разделе Окрашивание цианиновых нуклеиновых кислот, проникающих в клетки - таблица 8.3, также могут оказаться полезными в качестве ядерных контркрашивателей для живых клеток.Красно-флуоресцентный краситель SYTO 17 (S7579) использовали в качестве ядерного контрастного красителя для зеленого флуоресцентного мембранного окрашивания DiOC 6 (3) (D273, Зонды для эндоплазматической сети и аппарата Гольджи - Раздел 12.4) и с иммуноокрашиванием флуоресцеином. а также с анализом апоптоза TUNEL с использованием ChromaTide fluorescein-12-dUTP (C7604, Анализы для подсчета клеток, пролиферации и клеточного цикла - раздел 15.4) для исследования деградации хроматина и денуклеаризации ткани хрусталика. Клетки Leishmania , окрашенные красителем SYTO 17, впоследствии можно было идентифицировать в клетках, которые они инфицировали.Краситель SYTO 59 (S11341) использовался в качестве красного флуоресцентного ядерного контрастного вещества в сочетании с зеленым флуоресцентным белком (GFP), экспрессируемым в лимфоидных клетках и клетках эмбриональных почек человека (использование органических флуоресцентных зондов в сочетании с GFP - Примечание 12.1). Краситель SYTO 59 также оказался очень полезным при изучении ооцитов Cryptosporidium , поскольку интенсивность окрашивания, по-видимому, связана с инфекционностью ооцитов.

Все эти оранжевые или красные флуоресцентные красители SYTO доступны по отдельности в виде растворов в ДМСО (красители нуклеиновых кислот - раздел 8.1) или в качестве компонентов набора SYTO Orange Fluorescent Stain Sampler Kit (S11360) или SYTO Red Fluorescent Stain Sampler Kit (S11340), которые содержат по 50 мкл каждого из шести разных оранжевых флуоресцентных или семи различных красителей SYTO с красными флуоресценциями для облегчения поиска лучший контрастный краситель для определенного типа клеток или тканей.

HCS NuclearMask и HCS CellMask Пятна

В анализах высокого содержания изображения (HCS) идентификация клетки или объекта является первым шагом автоматизированного получения и анализа изображений.Для многих алгоритмов анализа изображений процесс идентификации клеток начинается с обнаружения флуоресцентно окрашенных ядер. Используя положение окрашенного ядра в качестве ориентира, программа затем экстраполирует, чтобы построить маску, которая отмечает вероятное положение цитоплазматической области.

Универсальные красители HCS NuclearMask, которые выдерживают стандартную фиксацию на основе формальдегида и методы проницаемости на основе детергентов, можно наносить на живые или фиксированные клетки. Для дополнительной гибкости в мультиплексных экспериментах реагенты HCS NuclearMask доступны в трех флуоресцентных цветах ( Рисунок 12.5.2 ):

Эти три красителя HCS NuclearMask оставляют область длин волн 500–600 нм прозрачной для мультиплексирования с зелеными или оранжевыми флуоресцентными зондами. Предоставляется достаточное количество для окрашивания десяти 96-луночных планшетов с использованием аналитического объема 100 мкл на лунку.

В некоторых приложениях HCS идентификация клеток, основанная только на ядерном окрашивании, неадекватна, потому что цитоплазматическая область, назначенная некоторыми алгоритмами анализа изображений, не точно определяет фактические границы клеток.В дополнение к этим красителям HCS NuclearMask мы предлагаем серию реагентов HCS CellMask, которые маркируют всю клетку (т. Е. Цитоплазму и ядро) и предназначены для создания точного фона, на котором можно оценить интересующие особенности:

Красители

HCS CellMask наносятся на клетки сразу после фиксации и пермеабилизации или после мечения антителами. Предоставляется достаточное количество для окрашивания десяти 96-луночных планшетов с использованием аналитических объемов 100 мкл на лунку.



Рисунок 12.5.2. Спектры поглощения
и флуоресценции A) красителей HCS NuclearMask Blue (h20325), B) HCS NuclearMask Red (h20326) и C) красителей HCS NuclearMask Deep Red (h20294).

Отслеживание хромосом через митоз

Многие окраски нуклеиновых кислот можно использовать для наблюдения за хромосомами, захваченными в процессе деления клеток в фиксированных клетках и тканях (,,,). Димерные цианиновые красители (окраски цианиновых нуклеиновых кислот, непроницаемые для клеточной мембраны - таблица 8.2, окраски нуклеиновых кислот - раздел 8.1) были использованы для наблюдения за движением митотических хромосом в живых клетках. Например, краситель YOYO-1 (Y3601) был микроинъектирован в клетки, чтобы проследить митотические хромосомы на протяжении как минимум шести клеточных циклов в оплодотворенных яйцах морских ежей (М. Терасаки и Л. Джаффе, личное сообщение) ( Рисунок 12.5.3 ).

Другой полезный метод отслеживания хромосом в митозе включает метаболическое включение микроинъектированных флуоресцентных нуклеотидов, включая наш флуоресцеин-12-dUTP (C7604, маркировка олигонуклеотидов и нуклеиновых кислот - раздел 8.2) эндогенными клеточными ферментами в ДНК. Включение флуоресцентного индикатора не мешает последующему прохождению клеточного цикла, и можно отслеживать флуоресцентные нити ДНК, когда они собираются в хромосомы и разделяются на дочерей и внучки.

Рисунок 12.5.3. Использование красителя YOYO-1 для отслеживания деления клеток в яйце морского ежа. Краситель YOYO-1 (Y3601) вводили в неоплодотворенное яйцо морского ежа.Яйцо оплодотворяли, а затем наблюдали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии. В этой последовательности изображения получали каждые 15 секунд. Каждое четвертое изображение отображается в первой части, затем каждое изображение отображается во время разделения хромосом. Изображение предоставлено Марком Терасаки, Центр здоровья Университета Коннектикута.

Ядерные контрасты для фиксированных клеток и тканей

Синие флуоресцентные контрастные пятна

DAPI (D1306, D3571, D21490;) - это классический ядерный и хромосомный контрастный краситель для идентификации ядер и наблюдения за паттернами хромосомных полос.DAPI селективно связывается с дцДНК и, таким образом, практически не проявляет фонового окрашивания цитоплазмы. Его относительно низкий уровень флуоресцентного излучения не подавляет сигналы от зеленых или красных флуоресцентных вторичных антител или зондов FISH. DAPI является полупроницаемым для живых клеток и может использоваться на незафиксированных клетках или срезах тканей (,). Мы также предлагаем DAPI, предварительно смешанный с нашими противоуглеродными реагентами SlowFade , SlowFade Gold и ProLong Gold (S36938, S36939, P36931, P36935; аксессуары для флуоресцентной микроскопии и эталоны - раздел 23.1) для одновременного окрашивания ядер и защиты от выцветания.

Краситель Hoechst 33342 (h2399, h4570, h31492) широко используется для окрашивания ядер живых клеток. Красители Hoechst преимущественно связываются с участками AT, что делает их довольно селективными (но не специфичными) для ДНК; Окрашенные красителем Hoechst клетки и ткани практически не окрашиваются в цитоплазму (). Краситель Hoechst 33342 обычно используется в сочетании с маркировкой 5-бром-2'-дезоксиуридином (BrdU, B23151; маркировка олигонуклеотидов и нуклеиновых кислот - раздел 8.2) различать компактный хроматин апоптотических ядер, идентифицировать реплицирующиеся клетки и сортировать клетки на основе их содержания ДНК (Анализы для подсчета клеток, пролиферации клеток и клеточного цикла - Раздел 15.4, Анализы на апоптоз - Раздел 15.5).

Голубой флуоресцентный краситель нуклеиновой кислоты BOBO-1 (B3582) излучает более яркий флуоресцентный сигнал, чем DAPI. BOBO-1 эффективно использовался в качестве контрастного красителя для хромосом Drosophila в сочетании с антителами, меченными красителем Cy3 или флуоресцеином.Окрашивание нуклеиновой кислоты SYTOX Blue (S11348, S34857) также излучает ярко-синюю флуоресценцию при связывании с нуклеиновыми кислотами и является очень хорошим красителем для ядер. Эмиссия флуоресценции комплекса SYTOX Blue с нуклеиновыми кислотами () несколько перекрывает эмиссию флуоресцеина, красителей Alexa Fluor 488 и Oregon Green 488, поэтому мы рекомендуем краситель SYTOX Blue только в качестве контрастного красителя для оранжевых или красных флуоресцентных красителей.

Зеленые флуоресцентные контрастные пятна

Некоторые из наших цианиновых красителей (специальные реагенты для нуклеиновых кислот для молекулярной биологии - Таблица 8.1, Проникающие через клеточную мембрану пятна цианиновой нуклеиновой кислоты - Таблица 8.2, Проникающие в клетку окрашивания цианиновой нуклеиновой кислоты - Таблица 8.3; Окраски нуклеиновой кислоты - раздел 8.1) оказались полезными в качестве флуоресцентных зеленых ядерных контрастных красок. Краситель YO-PRO-1 (Y3603) и краситель SYTOX Green (S7020,) являются отличными ядерными контрастными красителями для клеток в культуре или для целых тканей (,,,), а также являются полезными контрастными красителями для срезов тканей. Краситель SYTOX Green показывает высокоселективное окрашивание ядер; Краситель YO-PRO-1 показывает более интенсивное окрашивание, но также слабо окрашивает цитоплазму и ядрышко.Краситель SYTOX Green использовался для отслеживания изменений ядерной морфологии в апоптозных клетках () и является компонентом некоторых наборов для анализа апоптоза Molecular Probes (Анализы на апоптоз - раздел 15.5). Краситель SYTOX Green использовался в качестве специфического ядерного контрастного красителя для многоцветной маркировки клеток имагинального диска Drosophila . YO-PRO-1, также входящий в состав некоторых наборов для анализа апоптоза Molecular Probes (Анализы апоптоза - Раздел 15.5), избирательно проникает в апоптозные клетки, что позволяет легко идентифицировать эту популяцию клеток с помощью проточной цитометрии ( Рисунок 12.5.4 ). Окрашивание ядер красителем YO-PRO-1 позволило идентифицировать отдельные клетки внутри отдельных живых перфузируемых микрососудов брыжейки.

Окрашивание с помощью красителей нуклеиновых кислот TOTO-1 (T3600) и YOYO-1 (Y3601) обеспечивает чрезвычайно чувствительный проточный цитометрический анализ ядер и изолированных хромосом человека. В этом исследовании окрашивание красителем YOYO-1 давало более чем в 1000 раз сигнал флуоресценции, полученный с митрамицином; кроме того, гистограммы как TOTO-1, так и YOYO-1 на ядрах, обработанных РНКазой, давали коэффициенты вариации, которые были по меньшей мере такими же низкими, как те, которые были обнаружены для йодида пропидия или митрамицина.Эти исследователи также обнаружили, что при одновременном окрашивании ядер красителями YOYO-1 и Hoechst 33258 (h2398, h4569, h31491) соотношение флуоресценции этих двух красителей варьировалось в зависимости от клеточного цикла. Это наблюдение предполагает, что наши цианиновые красители могут быть полезны для изучения зависимых от клеточного цикла изменений, которые происходят в структуре хроматина. Окрашивание красителем YOYO-1 также позволило обнаружить дискретные рибосомы-содержащие домены в цитоплазме аксонов зрелых клеток, которые, как традиционно считается, не содержат транскрипционной активности.Кроме того, краситель YOYO-1 был использован в качестве контрастного красителя для иммунофлуоресцентного окрашивания хроматина в ядрах развивающихся эмбрионов Drosophila .


Рисунок 12.5.4 Проточно-цитометрический анализ клеток Jurkat с использованием набора мембранной проницаемости / апоптоза мертвых клеток (V13243), который содержит YO-PRO-1 и йодид пропидия. Клетки Т-клеточного лейкоза человека Jurkat сначала подвергали воздействию 10 мкМ камптотецина в течение 4 часов (левая панель) или оставляли без обработки (в качестве контроля, правая панель).Затем клетки обрабатывали красителями YO-PRO-1 и йодид пропидия (PI), входящими в комплект Membrane Permeability / Dead Cell Apoptosis Kit, и анализировали проточной цитометрией. Обратите внимание, что клетки, обработанные камптотецином (левая панель), имеют значительно более высокий процент апоптотических клеток (обозначен буквой «А»), чем базальный уровень апоптоза, наблюдаемый в контрольных клетках (правая панель). V = жизнеспособные клетки, D = мертвые клетки.

Желто-флуоресцентный контрастный краситель

Длинноволновый индикатор ядерно-желтый (Hoechst S769121, N21485;,) часто сочетается с популярным ретроградным индикатором true blue (T1323, Polar Tracers - Раздел 14.3) для двухцветного нейронального картирования. В нейрональных клетках ядерный желтый цвет в первую очередь окрашивает ядро ​​желтой флуоресценцией, тогда как истинный синий цвет представляет собой возбудимый ультрафиолетовым светом двухвалентный катионный краситель (), который окрашивает цитоплазму синей флуоресценцией. И ядерный желтый, и истинный синий стабильны при иммуногистохимической обработке и могут использоваться для фотопреобразования DAB в нерастворимый электронно-плотный продукт реакции (флуоресцентные датчики для фотопреобразования диаминобензидиновых реагентов - примечание 14.2).

Оранжевые флуоресцентные контрастные пятна

Цианиновые красители

BOBO-3 (B3586) и SYTOX Orange (S11368,) имеют флуоресценцию, аналогичную испусканию PI, но демонстрируют большее усиление флуоресценции при связывании с ДНК и поэтому должны обеспечивать более яркое ядерное окрашивание. Краситель BOBO-3 использовался в качестве ядерного красителя в цельных эмбрионах Xenopus laevis . Красители YOYO-3 (Y3606) и YO-PRO-3 (Y3607) демонстрируют сильное и специфическое окрашивание ядра в большинстве культивируемых клеток.

Красные флуоресцентные контрастные пятна

Иодид пропидия (PI; P1304MP, P3566, P21493) долгое время был предпочтительным

.

10 подтвержденных наукой причин есть больше белка

Поскольку диета с высоким содержанием белка ускоряет метаболизм и приводит к автоматическому снижению потребления калорий и тяги к еде, многие люди, которые увеличивают потребление белка, имеют тенденцию терять вес почти мгновенно (28, 29) .

Одно исследование показало, что женщины с избыточным весом, которые потребляли 30% калорий из белка, теряли 11 фунтов (5 кг) за 12 недель, хотя они и не ограничивали свою диету намеренно (7).

Белок также полезен для сжигания жира при преднамеренном ограничении калорий.

В 12-месячном исследовании с участием 130 людей с избыточным весом, соблюдающих диету с ограничением калорий, группа с высоким содержанием белка потеряла на 53% больше жира, чем группа с нормальным белком, потребляющая такое же количество калорий (30).

Конечно, похудение - это только начало. Для большинства людей поддержание потери веса является гораздо более сложной задачей.

Было показано, что умеренное увеличение потребления белка помогает поддерживать вес. В одном исследовании увеличение количества белка с 15% до 18% калорий приводило к снижению веса на 50% (31).

Если вы хотите избавиться от лишнего веса, подумайте о постоянном увеличении потребления белка.

РЕЗЮМЕ Увеличение потребления белка может не только помочь вам похудеть, но и сохранить его в долгосрочной перспективе.
.

Оценка генетических вариаций в проростках кукурузы, подвергнутых воздействию электрического поля, на основе белков и ДНК-маркеров

  • Журналы
  • Публикуйте у нас
  • Партнерские отношения с издателями
  • О нас
  • Блог

BioMed Research Menu

+ Журнал BioMed Research International + Journal обзор

Авторам Рецензентам Для редакторов Содержание

Специальные выпуски

ОтправитьBioMed Research International / 2015 / СтатьяСтатья Разделы

На этой странице

.

Смотрите также



Образ невесты Подготовка к свадьбе Организация свадьбы Развлечения на свадьбе Поздравления и тосты на свадьбу Свадебные приметы, горосокопы и гадания
Club Brides - Клуб Невест

Как показывают статистика и практика, в подавляющем большинстве случаев именно невеста является главным идеологом и главной движущей силой процесса подготовки к свадьбе.
Как подобрать счастливую дату свадьбы, как стильно и оригинально оформить свадебные приглашения, как выбрать самое красивое свадебное платье, какую сделать прическу, каким должен быть букет невесты, во что одеть подружек невесты, где организовать банкет, как оформить банкетный зал, какого фотографа и видеооператора пригласить… Вопросов при подготовке к свадьбе возникает сотни… Без совета и помощи не обойтись.
Свадебный портал «Клуб Невест» (Club Brides) посвящен всем самым главным вопросам, которые возникают у будущих молодоженов в процессе подготовки к свадьбе, а также всем тем вопросам и нюансам, которые необходимо учесть, чтобы свадьба стала действительно красивым, ярким, веселым и запоминающимся событием.
Мы подскажем вам, как подобрать счастливую дату свадьбы, как стильно и оригинально оформить свадебные приглашения, как выбрать самое красивое свадебное платье, какую сделать прическу, каким должен быть букет невесты, во что одеть подружек невесты, где организовать банкет, как оформить банкетный зал, какого фотографа и видеооператора пригласить и многое-многое другое…


2015- © Club Brides - Клуб Невест | Содержание | Карта сайта
Копировать материалы без размещения прямой активной ссылки на CLUBBRIDES.RU запрещено!